В данной работе проводится обсуждение и критический анализ исследовательских работ по медузе Turritopsis nutricula. (текст полностью на https://sites.google.com/site/chernilevsky/ )     

 Медуза Turritopsis nutricula, которая считается единственным на планете бессмертным существом, оказалась под пристальным вниманием ученых в связи с проблемами старения и продления жизни человека. Её бессмертие объясняют тем, что, в отличие от большинства видов медуз, которые  после участия в репродуктивном цикле умирают после достижения половой зрелости, T.nutricula может снова превращаться в молодую особь и способна повторять этот цикл бесконечно. T. nutricula даже считают единственным бессмертным видом среди всех многоклеточных. Имеется серия работ, в которых сами исследователи дают такое заключение о бессмертии T.nutricula. Эти работы позволяют проанализировать полученные результаты с точки зрения общей биологии, биологии старения и возможности продления жизни человека [1-6,10-11].

Общие сведения о медузах

         Медузы подразделяются на классы: гидромедузы (гидроидные), сцифомедузы и кубомедузы. Известно более 1500 видов медуз. Это самые длительно живущие виды в мире, они существуют более 650 млн лет. Их тела очень уязвимы и легко повреждаются при контакте с твердым предметом. Поэтому способность этих видов выживать связана у них с многообразием жизненных циклов (ЖЦ), форм размножения и высокой степенью регенерации тела.

Класс Гидроидные (Hydrozoa), к которым относится T.nutricula, – это наиболее низшие беспозвоночные типа кишечнополостных (Coelenterata). В ЖЦ многих кишечнополостных животных закономерно чередуются поколения полипов и медуз. В определенный сезон полипы (бесполое поколение) отпочковывают личинок медуз, которые развиваются в свободноплавающие медузы. Достигнув половой зрелости, медузы продуцируют половые клетки, и из оплодотворенных яйцеклеток развиваются личинки-планулы, которые, оседая на дно, превращаются в полипы.

Регенерация у медуз достаточно изучена. Из части полипа может регенерировать весь полип, а  из достаточно большого фрагмента, вырезанного у медузы, может образоваться новая медуза, аналогичная в морфологическом и в функциональном отношении. Такой регенеративный процесс строго специфичен - из фрагмента ткани полипа может образоваться только полип, из куска ткани медузы - только медуза, а из фрагмента определенной ткани регенерирует медуза того же типа. Во взрослом организме кишечнополостных есть специализированные клетки - книдобласты, железистые, эпидермальные, мышечные, интерстициальные (i-клетки) и др., которые при регенерации из фрагмента ткани должны возникать, как считают, из уже имеющихся таких же клеток, либо вследствие трансформации одного типа клеток в другой.

       Продолжительность жизни гидроидных медуз с метагенетическим ЖЦ развития в планктоне составляет несколько месяцев и они умирают вскоре после выпуска гамет.

       В роде Turritopsis  известно несколько видов. Они заселяют моря тропического и умеренного поясов. Медуза Turritopsis nutricula известна ученому миру давно - ее описание опубликовано в 1857 году (McCrady). Размножение T.nutricula и ЖЦ - обычный для гидрозоев - чередование бесполых и половых поколений.

Опыты, объяснения полученных результатов и заключения исследователей Turritopsis nutricula.

       В конце прошлого века итальянский ученый Фернандо Боэро случайно обнаружил полипы в  высохшем аквариуме, где, кроме рыбок, жили несколько особей T.nutricula. Полипы напоминали медуз T.nutricula, но без щупалец. После наполнения аквариума водой через некоторое время они ожили и стали развиваться, затем от полипов начали отпочковываться крохотные особи медуз T.nutricula. Объясняли это тем, что под действием неблагоприятных факторов, угрожавших им гибелью, они из взрослых животных вернулись к "детскому возрасту". Медузы отбросили ненужные щупальца, осели на дно, и превратились в маленьких полипов, которым было легче перенести обезвоживание аквариума. По существу этот факт представлялся как возврат животного из старческого возраста в детскую стадию, и если этот цикл повторять бесконечно, то теоретически получается, что медузы Turritopsis nutricula способны жить вечно.
      Обратная трансформация развития изолированных зародышей медузы в полипы была установлена у видов: Podocoryne carnea [13,16], Eleutheria dichotoma , Cladonema sp., Cladonema uchidai [14] и Perarella schneideri . Однако это происходило только в начале развития, у зародышей медуз, а после отделения их от полипа такая способность полностью исчезала.

      Bavestrello с соавт. [12] сообщили о том, что сексуально незрелая медуза Turritopsis nutricula   может возвращался к стадии полипа, давая начало столонам и гидроидным  колониям. При этом отмечались различная форма и анатомическая организация медузы и полипа, а также различный набор соматических клеток. Поэтому трансформация медузы в полип должна происходить заменой клеточных типов, регенерацией тканей и реорганизацией.

      Piraino с соавт. [15 ] изучали потенциал и пусковые механизмы такой трансформации в течение всей жизни T. nutricula, а также клеточные основы этого процесса. Для объяснения процесса трансформации медузы на клеточном уровне проверялись две гипотезы: 1 - все дифференцированные соматические клетки медузы дегенерируют, а производство клеток полипа определяется запасом стволовых i-клеток; 2 - дифференцированные клетки медузы могут быть трансдифференцированы и произвести необходимые новые типы клеток полипа.

       Исследования проведены на 4000 медузах Turritopsis nutricula, взятые из Средиземного моря. Половая зрелость достигалась после 25-30 дней при 20°C на стадии с 16 щупальцами.

Трансформация экспериментально вызывалась в течение развития к половой зрелости: (a) голоданием, (b) внезапным повышением или снижением температуры воды (от 22°C до 17 или 27°C), (c) уменьшением солености воды (90%-ая морская вода, 10%-ая дистиллированная вода, S = 33 %), (d) механическим повреждением колокола щипцами или ножницами.

        Установлено:

       Все незрелые медузы (до стадии с 12 щупальцами), подвергнутые этим воздействиям, преобразовались в полипы и столоны. Если их выращивать при нестрессовых условиях, они никогда не трансформировались в полипы. Во время созревания гонад (нерегулярный переход от стадии 13 до 15-щупальцев) вид трансформации в полипы изменялся. Напротив, все сексуально зрелые медузы (на стадии с 16 щупальцами) регрессировали спонтанно и полностью трансформировались в столоны и полипы.

       Т.о., все стадии медузы Turritopsis nutricula до половой зрелости могут трансформироваться в полипы. Эксперименты на вырезанных фрагментах медузы показали, что преобразование медузы в полипы происходит только в присутствии дифференцированных клеток верхней эпидермы колокола и части гастроваскулярной системы медузы.

       После начала полового размножения трансформация не происходит. В большинстве случаев ПЖ медуз ограничена фазой роста, приводящей к половозрелости и освобождению гамет,  сопровождаемого распадом клеток и смертью организма.

Т.о., установлен предел в ЖЦ этого вида преобразования зрелых медуз  T. nutriculu в столоны и полипы.

       Возможны 2 пути трансформации медуз: форма медузы изменяется, колокол инвертируется или погружается на дно без инверсии,  щупальца и мезоглея (средний слой) распадаются, незрелые медузы трансформируются в шаровую ткань (киста), покрытую перисарком, и погружаются на дно. При температуре 22°C столоны образовывались в течение 3 дней. При 14°C воды процесс замедлялся до 3 мес. без потери способности производить полипы после повышения температуры до 22°C.

       Эксперименты на вырезанных фрагментах медузы показали, что трансформация происходит только во фрагментах, содержащих ткань верхней части колокола и систему каналов (радиальные каналы или кольцевой канал). I-клетки не играют активную роль в эпидерме верхней части колокола и в каналах. Эпидерма колокола - единственная ткань, способная преобразовать в перисарк-секретирующую эпидермальную ткань столонов. Таким образом, авторы заключают, что эпидермальный тип клеток колокола подвергается трансдифференцировке. Однако его потенциал ограничен, потому что эти фрагменты не в состоянии воссоздать эндодерму, необходимую для окончания  процесса преобразования. Выравнивание эндодермальных каналов очевидно создает  клетки, которые дают начало эндодерме столонов и полипов. Перисарк-секретирующие клетки столонов, вероятно, сформированы трансдифференцировкой некоторых клеток экс-зонтика. Для завершения процесса трансформации медузы или фрагмента участвуют сенсорные нейроны, миоэпителиальные клетки и книдоциты. Присутствие i-клеток может быть ответственным за завершение изменения типов клеток.

 Заключение авторов. Среди кишечнополостных и вообще всех многоклеточных организмов медуза Turritopsis nutricula имеет уникальный ЖЦ в том, что на любой стадии развития и даже достигнув половой зрелости, она способна к возвращению на стадии полипа как ответ на неблагоприятные условия, включая старение. Смерти организма у этого вида не происходит. Неизвестно, встречаются ли эти процессы при естественных условиях, потому что они имеют место в довольно короткий промежуток времени и их трудно наблюдать в природе. Однако лабораторные исследования демонстрируют, что у T. nutriculu есть трансформационный потенциал, который никогда не регистрировался у других видов, и кажется невероятным, что такой потенциал выражен только при лабораторных условиях.

        Обсуждение

        Анализируя исследования Piraino с соавт., следует отметить неточность определения начала половозрелости (ПЗ) медуз. Авторы правильно отмечают, что старение и смерть медуз происходит при половом размножении, т.е. начиная с момента ПЗ. ПЗ медуз они определяли по числу щупалец, 16, хотя известно, что у взрослых особей число их может достигать 80-100. При наличии в опытах 4000 медуз необходимо было вести контрольную группу до ПЗ. До ПЗ медузы не должны стареть. Поэтому можно сделать вывод, что опыты по трансформации медуз проводились до начала их старения, т.е. на нестареющих организмах.

        Авторы подчеркивают, что в опытах используют зрелых медуз, даже достигших ПЗ или говорят, что трансформация отменяет старение медуз. Действительно, при старении медуз с момента ПЗ трансформация в полипы не происходила. Можно было бы считать, что именно старение отменяет процесс трансформации. Однако трансформация не происходит и до ПЗ, у нестареющих медуз при нормальных, нестрессовых, условиях. То есть трансформация и старение медузы не связаны между собой. Трансформация происходит только при стрессовых воздействиях, к которым авторы неправильно относят и старение. А комментаторы связывают этот процесс с пренебрежимым старением.

        В процессе трансформации взрослая медуза фактически прекращает (без старения) своё существование как целостный организм и создает зародыш полипа, т.е. другой организм, отличающийся от неё морфологией, физиологией и типом клеток. Некоторые исследователи обозначают этот процесс как реверс или "обратное развитие”. А комментаторы такого объяснения связывают обратное развитие с омоложением медузы или превращением её в зародыш. На самом деле зародыши медузы следующего поколения образуются не из медузы, а из зародышевых, медузоидных, почек полипа, который прошел развитие от зародыша полипа до зрелости. То есть чередование поколений организмов и развитие в ЖЦ идет всегда вперед. В зависимости от внешних условий ЖЦ может иметь несколько путей.  В ЖЦ медузы T. nutriculu имеются 3 пути.

1-й путь. При благоприятных условиях, когда трансформация невозможна, медуза достигает ПЗ, размножается половым способом, стареет и гибнет, а планулы (бесполые организмы) создают полипы (бесполые поколения в ЖЦ), которые дают много медуз следующего поколения, отличных от одной предыдущей медузы. При этом новые  поколения полипов и медуз имеют изменённый генотип по отношению к материнской медузе.

        2-й и 3-й пути возможны только при неблагоприятных для нормального развития условиях, а именно сдерживающих, замедляющих развитие, или делающих его невозможным. Известно, что при таких условиях сидячие формы полипов, модульные организмы многих видов задерживают развитие, редуцируются, перестраиваются и трансформируются. У свободноплавающих медуз это грозит гибелью. Единственный путь – трансформироваться в бесполую форму полипа. И такая трансформация частично возможна у многих видов медуз, а у T. nutricula она выражена на 100%. Неслучайность такого явления говорит о том, что надёжность трансформации медузы в полипа выработана и закреплена в процессе эволюции. То есть это не искусство эксперимента, как отмечают авторы, а обычное, распространённое явление в природе и очень важное для существования вида миллионы лет. T. nutricula обитает в прибрежных водах тропических морей и океанов. Длина прибрежных линий в мире исчисляется сотнями тысяч км. Во время регулярных приливов и отливов медузы могут периодически попадать на сушу и в море, трансформируясь в полипы (как и в аквариуме Фернандо Боэро) и продолжая ЖЦ. Периодические сезонные изменения температуры воды должны также вызывать трансформацию медуз. Т.о., 3 пути в ЖЦ медузы обеспечивают бессмертие этого вида, при этом 1-й путь обеспечивает генетическое разнообразие и расцвет вида в эволюции, а 2-й и 3-й – переживание регулярно происходящих неблагоприятных условий, а также обеспечивают большую численность медуз, многие из которых далее проходят и 1-й путь. Все 3 пути заканчиваются стадией полипа, от которого начинается очередной ЖЦ.

         Нами показано, что единицей развития организмов является ЖЦ, в котором могут чередоваться несколько поколений организмов с ограниченной ПЖ [11]. ЖЦ имеет больше возможностей для выживания и большую по сравнению с отдельным организмом ПЖ, но ограниченную. Бессмертие видов обеспечивается регулярной повторяемостью ЖЦиклов, выработанных в эволюции. Поэтому ПЖ медуз обычно составляет 3-4 мес и они прекращают индивидуальное существование от старения или при трансформации без старения. Не обнаружено медуз T. nutricula, возраст которых исчислялся бы тысячелетиями, тем более бессмертных медуз. Вид T.nutricula, как и все виды, бессмертен.

         Заключения авторов основаны на недостаточных представлениях о жизненных циклах, бесполом размножении, о реверсе и об обратном развитии.

         Проблема бесполого размножения (БР) имеет отношение к общебиологическим проблемам регенерации, соматического бластогенеза (или эмбриогенеза), развития, старения и продления жизни. Фактические материалы по БР рассеяны в многочисленных работах, не имеющих отношения к БР, потому что в англоязычной литературе проблема БР пренебрегается, она считается непризнанной, часто само понятие БР применяется упрощенно или неправильно. Например, партеногенез понимают как БР. Большая работа по сбору, обобщению и анализу работ, связанных с БР, выполнена учеными кафедры эмбриологии ЛГУ [1,2,6]. Стало очевидным, что некоторые животные имеют 2 и более типов индивидуального развития – эмбриогенез и бластогенез, а формы БР у разных животных произошли на основе регенерации и соматического бластогенеза (развитие нового организма из части или комплекса клеток старого). При БР многие клетки дедифференцируются и ткани омолаживаются. Соматический бластогенез характерен для низкоорганизованных и слабоинтегрированных форм, и все внешние и внутренние факторы, которые снижают степень интеграции, способствуют соматическому бластогенезу. Это наиболее характерно для Hydrozoa. В опытах с T.nutricula внешние воздействия приводили к дезинтеграции  клеточных систем, тканей, органов или организма медузы. Далее происходила сборка заново – соматический бластогенез полипа. Поэтому описанная трансформация T.nutricula в полип является видом бесполого размножения в ЖЦ медузы.

         В ЖЦ других видов медуз БР - это почкование в колонии полипов. Медузоидные почки развиваются у разных видов в разных частях колонии полипов [2]. У многих гидроидов в почках до отделения их от полипа происходит скопление i-клеток, и развитие почек в гонофоры и затем в медузы детерминируется этими клетками [2]. I-клетки передаются медузе. Многие виды медуз могут размножаться почкованием бесполым путем и при этом почти всегда производят медуз, а у гидромедузы Eleutheria dichotoma, которая после обособления от полипа приступает к бесполому размножению почкованием, обнаружена не только способность регенерировать утраченные части тела, но и возможность развития заново из небольших фрагментов по типу соматического эмбриогенеза [2,6]. У медуз Rathkea медузоидные почки и гонады развиваются на одном и том же месте (на хоботке) и даже из одних и тех же i-клеток. При переходе к половой репродукции медузы производят гоноциты из i-клеток [2]. Первичные половые клетки у гидрозоев с половым и бесполым размножением образуются у взрослых организмов. Следовательно в опытах Piraino медузы T.nutricula были бесполыми, т.е. нестареющими.

        Учитывая изложенное выше, следует особо рассмотреть процессы регрессивной трансформации, или обратного развития.

В опытах с медузоидными почками, возникающими на полипе Podocoryne carnea, детерминация медузоидной организации происходит сравнительно поздно, когда отчетливо видны морфологические признаки медузы [13,16]. Авторы [ 13,16] выделили, по морфологическим критериям, 10 последовательных стадий развития медузы. Медузоидная почка, отделенная от полипа на 1-4 стадиях, может испытывать обратное развитие, приводящее к формированию шаровидного двухслойного зародыша, который может прикрепиться и дать начало столону. Медузоидные почки  5-8 стадий развиваются в нормальную медузу. На разных стадиях формирования медузоидные почки подвергали диссоциации. Агрегаты клеток, полученные из взвеси медузоидных почек до 7-й стадии, развивались в столоны и полипы, а агрегаты почек поздних стадий развивались в медуз [13,16]. В очень редких случаях (6 из 4900) при неблагоприятных условиях агрегаты изолированных клеток взрослой гидромедузы трансформировались в столоноподобные структуры. Это явление получило название регрессивной трансформации. Следует отметить, что т.н. регрессивная трансформация, понимаемая как обратное развитие, существенно отличается от прямого развития. На клеточном уровне прямое развитие связано с дифференцировкой клеток, а обратное – с дедифференцировкой и трансдифференцировкой. На уровне систем организма прямое развитие связано с централизацией интегрирующих систем, а обратное – с их децентрализацией, вплоть до зародышевого состояния. Более правильным "обратное развитие” и "регрессивная трансформация” у T.nutricula следовало бы называть соматический бластогенез как форма БР в ЖЦ данного вида. В ЖЦ T.nutricula происходит последовательное (прямое развитие) чередование двух бесполых процессов у медузы и полипа.

        Авторами [15] проверялись две гипотезы о клеточных источниках трансформации медузы в полипа:   1 - все дифференцированные соматические клетки медузы дегенерируют, а производство клеток полипа определяется запасом i-клеток; 2 - дифференцированные клетки медузы могут быть трансдифференцированы и произвести необходимые новые типы клеток полипа. Обычно такие гипотезы обсуждаются при изучении регенерации, т.е. процессов восстановления органов и тканей у одного организма (например, медузы). В этом случае преимущество имеет 2-я гипотеза.

         Трансдифференцировка понимается как способность взрослой региональной стволовой клетки (СК) дифференцироваться в клетки «своего» органа и трансдифференцироваться в клетки другого органа и/или другого зародышевого листка в следующей последовательности: СК - дифференцировка - дедифференциировка – дифференцировка.

        Другие исследователи описывают возможные виды трансдифференцировок при регенерации у медуз. Среди соматических клеток гидромедуз лучшими по способности к трансдифференцировке являются поперечно-полосатые мышечные клетки мезоглеи. При культивировании их в морской воде они дифференцировались, митотически делились и образовывали конгломераты клеток, из которых развивались структуры, близкие к манубриуму [16,18,19]. Трансформация мышечных клеток (после обработки коллагеназой) происходит в несколько этапов [18]. Первый этап – трансформация поперечно-полосатых мышечных клеток в гладкомышечные. Она происходит до начала синтеза ДНК и первого митоза. Этот процесс тормозится ингибиторами транскрипции и трансляции. Гладкомышечные клетки способны реплицировать ДНК и вступать в митоз. После завершения 1-го клеточного цикла появляются нервные клетки. В результате следующих митозов гладкомышечных клеток в конгломератах возникают пищеварительные, железистые, секреторные клетки и нематоциты. Эти виды трансдифференцировок совершаются параллельно с образованием клеточных пластов и их поляризацией. Таким образом, для трансдифференциации мышечных клеток в клетки разных типов требуется прохождение разного числа митозов. Регуляция этих процессов связана с образованием надклеточных структур, т.е. с прогрессивным течением морфогенеза.

        Однако при объяснении механизма различных трансдифференцировок при регенерации у ученых есть серьезные разногласия и свои гипотезы.

Гипотеза временной дедифференцировки клеток: в ответ на регенерационный стимул дифференцированные клетки могут утрачивать признаки специализации, но затем снова дифференцируются в тот же клеточный тип, т.е., потеряв на время специализацию, они не утрачивают детерминацию. Вероятно, дедифференцировка идет не до конца, и каждый тип клеток в ходе редифференциации воспроизводит только самого себя.
        Трансдифференцировка - превращение одного типа дифференцированных клеток в другие и метаплазия как вид трансдифференцировки - превращение производных одного зародышевого листка в производные другого листка. Такие процессы описаны у ряда беспозвоночных: кишечнополостных,  кольчатых червей, немертин, а также у асцидий. К метаплазии можно отнести и глубокую трансдифференцировку клеток края колокола медуз, описанную Ф.Шмидом [17]. Он установил, что из изолированной поперечнополосатой мускулатуры может возникать гладкая мускулатура, стрекательные, пищеварительные, стволовые i-клетки, а при наличии контактов с энтодермой – и нервные клетки. Метаплазия часто вовлекает трансформацию СК, которые продуцируют несколько клеточных типов, характерных для разных тканей. Метаплазии почти всегда возникают в тканях, которые имели хронические повреждения, т.е. подвергались постоянной регенерации. Когда возникают участки метаплазии, они часто состоят из тканевого типа, обычно происходящего из соседнего региона.

        Трансдетерминация - переключение детерминации СК с одного пути на другой. Существенное значение при этом имеет взаимодействие СК с клетками "ниши", в которых находятся СК.

Согласно гипотезе резервных клеток, предшественниками регенерационной бластемы являются резервные СК. Известно, что у кишечнополостных i-клетки скапливаются вблизи раневой поверхности и из них могут возникать все остальные типы клеток [6].

Однако при трансформации медузы T.nutricula происходит не регенерация, а формирование заново другого организма, полипа, такого же, из которого произошла эта медуза. Такие же полипы в ЖЦ могут образовываться и другими путями. В статье Piraino описываются: 2 вида трансформации медуз - с инвертацией и без инвертации колокола, 4 вида неблагоприятных воздействий, а также развитие планулы. В результате всегда образуется только зародыш полипа. При регенерации медуз такого не происходит.

Известно, что в развитии зародыша всех видов участвуют тотипотентные СК, или первичные СК у гидроидных, у T.nutricula это i-клетки. Основой развития, жизнеспособности и размножения нового организма являются также СК [9]. Поэтому во всех процессах развития медузы в полипа заново СК должны играть важную роль. В серии работ [3-5,7] исследована роль СК в половом и бесполом размножении представителей пяти типов животных: губки Oscarella malakhovi (Porifera), гидроида Obelia longissima (Cnidaria), планарии Girardia tigrina, ракообразных Peltogasterella gracilis, Polyascus polygenea и Thylacoplethus isaevae  и асцидии Botryllus tuberatus (Chordata). Установлено, что у этих животных линии тоти- и/или мультипотентных СК - археоцитов губок, i-клеток кишечнополостных, необластов турбеллярий и СК асцидий представляют самообновляющийся резерв СК с неограниченным или широким морфогенетическим потенциалом, поддерживаются на протяжении всей жизни индивида и являются источником клеточного материала для реализации полового и бесполого размножения, регенерации и они способны дифференцироваться в половые и соматические клетки. Множество молекулярно-биологических данных свидетельствует об общности морфофункциональной организации тотипотентных СК, в том числе и половых, у всех многоклеточных организмов [1-7]. В настоящее время предложено называть эти клетки "первичными СК”. Они характеризуются присутствием в цитоплазме т.н. зародышевой плазмы, содержащей зародышевые (половые) детерминанты, структурированные в виде герминальных гранул или дисперсного материала, которые являются  специфическим ультраструктурным маркером и ключевым органоидом клеток половой линии и первичных СК беспозвоночных [3-5,7].

         Первичные СК беспозвоночных с бесполым размножением традиционно рассматриваются как тотипотентные, хотя тотипотентными признаны i-клетки только у Hydractinia echinata. Как правило, не одна СК, а некий их комплекс дает начало новому организму или зооиду при бесполом размножении, становясь обладающим теми же потенциями, что и одна половая клетка [3]. Число первичных СК, способных дать бластозооид книдарий и асцидий, определено в пределах 100–300 клеток. Необходимо создание "критической массы” клеток для развития организма. "Эффект массы” объясняется созданием в клеточных агрегатах определенной концентрации необходимых метаболитов. Наличие "критической массы” клеток, по-видимому, необходимо для создания специализированной ниши для реализации потенций СК при  формировании бластозооида беспозвоночных. СК  способны к миграциям. Эти мобильные СК, рассеянные в соме организма, рассматриваются как независимые от определенной ниши. В разных комплексах клеток var container = document.getElementById('nativeroll_video_cont'); if (container) { var parent = container.parentElement; if (parent) { const wrapper = document.createElement('div'); wrapper.classList.add('js-teasers-wrapper'); parent.insertBefore(wrapper, container.nextSibling); } }